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高效液相色谱仪的基本概念和术语

来源:未知      发布日期:2018-12-15 14:02    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪的基本概念和术语




       高效液相色谱仪实验完成后,需要后期数据处理,那就要会看色谱图,了解色谱图的专业术语很有必要。本文就介绍一下高效液相色谱仪的基本概念和术语。


 

1.色谱图和峰参数
 
色谱图:样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线。
 
基线:经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
 
噪音:基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
 
漂移:基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
 
色谱峰:组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线不对称色谱峰有两种:前延峰和拖尾峰。前者少见。
 
拖尾因子:用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子或不对称因子。
 
峰底:基线上峰的起点至终点的距离。
 
峰高:峰的最高点至峰底的距离。
 
峰宽:峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。
 
半峰宽:峰高一半处的峰宽。
 
峰面积:峰与峰底所包围的面积。
 
2.定性参数(保留值)
 
死时间:不保留组分的保留时间。即流动相通过色谱柱的时间。
 
死体积:由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分:进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙、柱出口管路体积、检测器流动池体积。
 
保留时间:从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。
 
保留体积:从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。
 
3.柱效参数
 
理论塔板数:用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。
 
理论塔板高度:每单位柱长的方差。实际应用时往往用柱长和理论塔板数计算。
 
4.相平衡参数
 
分配系数:在一定温度下,化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的浓度之比。分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。
 
容量因子:化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的量之比。因此容量因子也称质量分配系数。
 
容量因子的物理意义:表示一个组分在固定相中停留的时间是不保留组分保留时间的几倍。
 
容量因子与分配系数的不同点是:取决于组分、流动相、固定相的性质及温度,而与体积无关。
 
选择性因子:相邻两组分的分配系数或容量因子之比。
 
5.分离参数
 
分离度:相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。
 
提高分离度有三种途径:
 
①增加塔板数。方法之一是增加柱长,但这样会延长保留时间、增加柱压。更好的方法是降低塔板高度,提高柱效。
 
②增加选择性。一般可以采取以下措施来改变选择性:
 
a. 改变流动相的组成及pH值; b. 改变柱温; c. 改变固定相。
 
③改变容量因子。这常常是提高分离度的最容易方法,可以通过调节流动相的组成来实现。


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